&苍产蝉辫; 一、操作步骤
1、准备工作
确保实验室环境清洁,实验台面整洁有序。准备好所需的固相萃取柱、样品、试剂、过滤设备等。 戴上实验手套和安全眼镜,保障操作安全。
2、样品预处理
将待处理样品溶解在合适的溶剂中,根据样品性质选择溶剂,如水溶性样品可选择水或缓冲溶液,有机样品可用有机溶剂。
进行过滤操作,可使用滤膜过滤,目的是去除样品中的固体杂质,确保样品溶液浓度适中,避免过浓或过稀影响后续萃取效果。
3、装填与平衡
将固相萃取柱垂直放置在支架上。
用适当的溶剂对柱进行平衡,对于颁18柱等反相柱,常用甲醇进行预处理,甲醇能湿润吸附剂表面并渗透键合烷基相,使硅胶表面更易被润湿;正相柱则用样品所在有机溶剂预处理;离子交换柱根据样品基质是极性或非极性溶剂采用相应溶剂预处理,且要让大约1尘濒的预处理溶剂留在管过滤片上以保持填料润湿。
4、样品加载
缓慢地将预处理后的样品溶液加入到萃取柱顶部,使样品在固相填料中均匀分布。如果加入速度过快,样品可能分布不均,导致部分填料未能与样品充分接触。
5、冲洗填料
若分析物保留在填料上,先用不能洗脱目标化合物的溶液冲洗,去除杂质。然后用比样品基质强度高但又不至于洗脱分析物的溶剂冲洗,例如对于弱酸性分析物,可以先用低辫贬值溶液冲洗杂质,再用适宜洗脱液洗脱。
6、洗脱
用少量能洗脱分析物的溶液冲洗填料,洗脱液在填料上停留适当时间,分多次少量洗脱比一次大体积洗脱效果更好。
7、收集洗脱液
将洗脱液收集到试管或烧瓶中,注意避免交叉污染。
8、再生、清洗和存储
根据需要,使用适当再生溶剂将残留杂质和化合物洗脱,清洗后把萃取柱存放在干燥、避光处。
9、记录数据
记录样品处理、使用情况和实验结果等数据,便于结果分析和实验复现。
二、使用技巧
流速控制方面,如重力法使用时流速宜慢,让样品与填料充分作用。
在选择萃取柱时,要根据样品性质选择合适的柱类型,像弱阴离子和酸性样品可选柱。
尽量避免复杂的洗脱程序,以简单有效为原则。
为了确保结果可靠,固相萃取柱应使用一次。