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厂颈濒颈肠补硅胶色谱柱的维护与使用
为获得最长的柱寿命,应避免使用不互溶的或有害的流动相。在选择和配制流动相时,应考虑下面几点:
1、决不要用不相溶的溶剂依次通过色谱柱。
确保即将泵入柱中的溶剂及目前在柱中的溶剂*相溶,否则必须泵入一种或多种互溶的中间溶剂于柱中,以免产生高压。
2、在流动相中只用纯溶剂。
制备流动相时,必须用高纯(HPLC级)溶剂。缓冲盐及离子对试剂中存在的痕量污染物在其它应用中可能不会产生问题,但若用于HPLC流动相中,则会导致严重的结果。使用不纯流动相会产生基线漂移或出现污染峰,特别是采用梯度洗脱时。痕量杂质也会吸附于柱头上,导致分辨率下降及柱寿命缩短。所有溶剂使用前都必须过滤并脱气。
3、注意一旦加入有机溶剂时缓冲溶液可能出现沉淀。
当在流动相中使用缓冲液、离子对试剂或其它盐时,应注意有机物含量增加时会出现沉淀。
4、不要使用能与键台相或硅胶发生化学反应的流动相。
大多数情况下,HPLC中使用的键合相相当稳定,一般而言,硅氧键将官能团键合至硅胶粒上,强酸条件下可能会出现硅氧键的水解,故流动相的PH值应保持在2.0(注意:有些色谱柱耐受限可达PH1.0)以上。若必要,也可用到PH2以下,但柱寿命将会缩短.