共创共赢
氯霉素由于其较强的毒副作用，许多国家禁止在食用动物饲养和治疗中使用；我国也明令其作为兽药禁用，且所有动物可食组织均不得检出。因此，研究一种、灵敏的检测乳品中氯霉素残留量方法，对我国的进出口贸易以及食品安全将具有重要意义。我国农业部于2002年发布的第193号公告中规定禁止生产、经营和使用氯霉素，在可食性动物组织中不得检出氯霉素。
方法优势：
对比《GB 29688-2013 食品安全国家标准 牛奶中氯霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》，本方案具有如下优势：
1、适用范围
适用于牛奶、奶粉等乳制品中氯霉素的检测，牛奶的检出限是0.01 μg /kg，定量限是0.1 μg /kg；奶粉的检出限是0.05 μg /kg，定量限是0.5 μg /kg。
2、提取
(1) 取10 mL牛奶样品(或2 g奶粉样品、10 mL水)，加10 mL 乙腈，涡旋1 min；
(2) 加10 mL 乙腈、2 mL乙酸铅(200 g/L)、4 g 氯化钠，涡旋2 min，7000 rpm下离心3 min，收集上清液；
(3) 取10 mL上清液，待净化。
3、净化—ProElut DPC 3 g/12 mL（Cat.#65353）
a活 化： | 10 mL乙腈活化； |
b上 样： | 加入待净化液，收集流出液； |
c洗 脱： | 加入10 mL乙腈，收集流出液，合并步骤b和步骤c流出液； |
d重新溶解： | 将流出液在40 ℃下减压蒸馏至干，用水定容至1 mL，供UPLC-MS/MS分析。 |
4、色谱条件
4.1 液相条件
色谱柱：Endeavorsil C18, 100 mm × 2.1 mm, 1.8 μm（Cat.# 87003）
流 速：0.2 mL/min 进样量：5 μL 柱 温：40 ℃
流动相：A：10 mmol/L乙酸铵溶液 B：乙腈
梯度设置
时间/Min. | 0 | 4 | 4.5 | 6 | 6.5 | 12 |
A（%） | 20 | 50 | 90 | 90 | 20 | 20 |
B（%） | 80 | 50 | 10 | 10 | 80 | 80 |
4.2 质谱条件
电离模式： | ESI | 扫描方式： | 负离子扫描 |
检测方式： | 多反应监测 | 电喷雾电压： | -4500 V |
雾化气压力： | 50 psi | 辅助气压力： | 50 psi |
气帘气压力： | 20 psi | 离子源温度： | 500 ℃ |
定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表
药物名称 | 定性离子对 （m/z） (母离子/子离子) | 定量离子对 （m/z） (母离子/子离子) | 碰撞气能量/V | 去簇电压/V |
氯霉素 | 321.0/151.8 | 321.0/151.8 | -24 | -80 |
321.0/256.9 | -15 |
5、添加回收结果
牛奶和奶粉中氯霉素的UPLC-MS/MS检测添加回收结果
基质 | 分析物 | 添加水平(μg/kg) | 回收率(%) |
牛奶 | 氯霉素 | 0.2 | 87.8 |
奶粉 | 氯霉素 | 1.0 | 82.6 |
乳制品中氯霉素的测定SPE-UPLC/MS/MS解决方案相关产物信息
货号 | 名称 | 规格 |
样品前处理 | ||
65353 | 乳品中农、兽药检测柱 ProElut DPC | 3 g/12 mL, 20/pkg |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取装置 | 12位 |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正压两用泵，无油 | 1/pk |
99013 | 抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞) | 1/pk |
37177 | 针头式过滤器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
37180 | 针头式过滤器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
色谱柱及保护柱 | ||
87003 | 超液相色谱柱 Endeavorsil C18 | 100 × 2.1 mm，1.8 μm |
标准品 | ||
50P-C11120000 | 氯霉素[56-75-7] | 250 mg |
HPLC溶剂Ÿ缓冲盐Ÿ离子对试剂 | ||
50101 | 乙腈 HPLC级 | 4 L |
50138 | 乙酸铵 HPLC级 | 100 g |
通用色谱产物 | ||
52401B | 瓶架/蓝色 | 50 孔 |
52401A | 瓶架/白色 | 50孔 |
5323 | 样品瓶（棕色/螺纹） | 2 mL, 100/pk |
5325 | 样品瓶盖/含垫（已经组装） | 100/pk |
